We Have More Than 10 Years of Experience.
top-ban
  1. HOME > News

Анализ и анализ влияния эффектов прополиса против света старения

2022-09-02

Когда кожа подвергается воздействию ультрафиолетовых лучей, чрезмерный активный кислород (АФК) 

[1 генерирует экспрессию генов, связанную с старением 
[2, индуцируя воспалительные комбинированные реакции и уменьшают объем экспрессии упругого белка и коллагена. 
[3, приводя к явлению старения, таким как релаксация и морщины кожи 
[4-6. В процессе сопротивления кожи экспрессия генов на самом деле является общей экспрессией защиты генов и генов повреждения. Защитные гены в основном включают матричную металлическую протеазу (MMPS ) Семейный ингибирующий белок генов и ингибирующие гены апоптоза 
[8, а ген повреждения в основном включает в себя гены, связанные с деградацией коллагена и гены, связанные с деградацией белка. Наиболее важный фермент коллагена типа III [9, когда клетки кожи чрезмерно экспрессируются MMP-1, структура внеклеточного матрикса слоя дермы сильно повреждена [10, особенно нормальная структура коллагеновых волокон и упругих волокон является Серьезно поразило [11, поэтому MMP-1 является наиболее важным ферментом, который вызывает симптомы старения, такие как морщины и тонкие линии 

[12. Выс. ММП-1 является основным показателем оценки оптического старения. Увеличение содержания Содержание АФК ускорит апоптоз и даже смерть скорости 

[13. Во время старения кожи воздействие ультрафиолета может вызвать избыток АФК в клетке кожи, что вызывает различные биологические эффекты ткани кожи 

[14 Пеломиум , снижение экспрессии антиоксидантного фермента и т. Д. Флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды, флавоноиды. Паратные вещества являются эффективными антиоксидантами, которые могут удалять свободные радикалы, защищающиеся клетки из -за свободы. Перекисное окисление свободных радикалов мозга и причинение повреждения 
[15. ESCIN также обладает сильной антиоксидантной активностью [19. Антиоксидантный механизм прополиса в основном для регулирования окисления организма и MDASH; восстановить баланс через прямую или непрямая регуляция ROS организм. Анализируя скорость удаления прополиса, экспрессию MMP-1, связанную с окислением, и содержание MMP-1 для оценки задержки с эффектом старения кожи прополиса, и обеспечить основу для развития и применения прополиса при старении кожного света. 

1 Материал и метод

1.1 Материалы и реагенты

Поглощающий прополис (произведенные в хенане) высыхание через свободу воды Этанол, темно -коричневое твердое вещество, имеет специальный аромат, хранилище в -20 ° C заморожено.

5%, растворимый экстракт прополиса с 75%этанолом, коричневой и черной жидкость Сохранение температуры; образцы полиэтиленгликоля полиэтиленгликоля: концентрация прополиса составляет 5%, 75%полиэтиленгликоля растворенного прополиса, коричневой и черной жидкости, коричневой и черной жидкости ,,, коричневая и черная жидкость, сохранение температуры платы.


1.2 Инструменты и оборудование

Анализ Денвера TB-215D, межгральной чистой воды/супер-чистой интегрированной воды (Merk Millipore), жидкой хроматографии с высокой эффективностью (Aglen 1200), CO2 Box (Thermo), Ultra -Net Workbench (Su Jing'antai), инвертированный микроскоп (Olympus), след следового осциллятора (его звень (TYST), потоковой цитометр (Beckman).


раствор этанола 5 мг и средняя; ML-1 настроен с помощью поглощения прополиса. После смешивания фильтра мембраны, ML-1 настроена. Поместите его в эффективный спектрометр жидкости для анализа и обнаружения. ; Длина волны обнаружения: 280 нм; температура столбца: 36 ℃; объем образца: 2  mu; 


Процесс элюирования градиента составляет: 0-25 мин, от 20%до 40%метанол; 25-55 мин. , От 40%до 55%метанола; 55-70 мин, 55%метанол; 70; 70 ~ 85 мин, от 55%до 100%метанол.

1,4 Цитическое обнаружение на основе фибробластов человека

В этом тесте есть 2 образца, установив 8 образцов, установите 8 на градиенте концентрации, установите 3 отверстия повторения при каждой концентрации. В то же время тест устанавливает отверстие для управления растворителями, нулевые поры ( Включая 10% новой среды с низким содержанием сахара в сыворотке крови говяжьей сыворотки), положительное отверстие для контроля (8% ДМСО). Этот тест проходит МТТ через метод МТТТТ для обнаружения жизнеспособности клеток и скрининга максимальной концентрации безопасности клеточных. следующие:

Получение суспензии клеток,После расщепления количества ячеек в течение длительного времени два вида образцов прополиса настроены с различными концентрациями (0,005%, 0,01%, 0,02%, 0,04%, 0,08%, 0,16%, 0,31%, 0,63%) разных Концентрации. Изучение испытательного материала. Когда скорость мощения ячейки достигает от 40%до 60%, он вводится. После завершения введения таблетка помещается в коробку для культивирования 37 ° C и 5%CO2. Добавьте MTT. Раствор, отремонтируйте свет от 37 ° C.4 ч, оставьте жидкость, добавьте 150  M MU; L второго базового суб -макарона, считывайте значение D490 нм с помощью ферментативной метки.



. Фибробласты. Экспрессия гена MMP-1 и содержание MMP-1 для оценки эффективности тестируемых объектов. Обнаружение скорости. Расщепление ячейки на 6 -отверстия, 24 ч в 37 ° C и 5% CO2 Culture Box. Согласно тестовому дизайну таблицы 1, настраивайте различные концентрации. Для введения группы в каждой группе существует 3 отверстия для восстановления. 37 ° C, 5%инкубация и обучение культурной коробки CO2 24 H. Согласно тестовой группе, пустая контрольная группа непосредственно проводит тестирование активности АФК; концентрация 1 мл на отверстие составляло 25  mu; mol  middot; L-1 DCFH-DA-зонд, 37 ° C-ящик для культивирования клеток 45 мин; отказаться от среды, содержащей DCFH-DA, убрать ее несколько раз с PBS . После клетки расщепления панкреазазы PBS очищают один раз, добавьте определенное количество свежих PBS, тест потока. Средняя прочность флуоресценции), используйте метод Teest для выполнения статистического анализа.



возьмите Расщепление количества клеток, которые принокулированы в 6-луночные планшеты, 37 ° C и 5% -ная культура CO2 культивируют 24 H. Согласно дизайну теста (Таблица 2), настройте испытательный материал с различными концентрациями. После культуры Завершен, соберите жидкость клеточной культуры для следующего этапа теста ELISA. Используйте PBS для очистки клеток 3 раза, используйте RNA изоплас, чтобы взломать клетки, каждое отверстие добавляет 1 мл раствора для растрескивания. Поместите 5 минут при комнатной температуре, чтобы сделать это Полностью расщепляется и переносится на пробирку Eppendorf без РНКазы, экстракт РНК, синтезируйте кДНК и обнаруживает экспрессию гена эластина.Лечение, используйте метод t-теста для статистического анализа. Обработано множитель амплификации мРНК контрольной группы. **.


1,5,3 ммп -1 Обнаружение содержания и сбор 1,4 клеточной среды в EP -трубке 1,5 мл, используемая для обнаружения MMP -1 ELISA. Собранная среда 1000 g сохраняется после центробежного -20 ℃, и тест ELISA белка MMP -1. Стандартный продукт разработан с 2 параллельными отверстиями в каждой группе, и каждая группа образца разработана с 3 параллельными отверстиями.


2 Результаты и анализ


2.1 Анализ ВЭЖХ соска прополиса

Результаты измерения цветового спектра высокой эффективности Пять флавоноидов с самыми высокими пиками, используемыми в этом эксперименте в этом тесте, являются элегантный хлороплазонин, сосна, хлорофиллин-3-ацетат, тополрин и Gao Liang Gingerin. Содержание составляет 3,57%от хлорофиллина, 4,61%вегетарианского вегетарианца, 7,62%от Eleneate-3-этилацетат, 5,16%тополна и высокий имбирь 2,07%.

2.2 , провести цитотоксические тесты обнаружения на фибробластах человека, результаты цитотоксических испытаний см. В тренде изменений жизненной силы клеток на рисунке 2.


Принимая 8 концентраций, выбранных в образце Как горизонтальные координаты, относительная ценность жизненной силы волоконных клеток в качестве вертикальных координат, рисуя относительную динамическую кривую ячейки. Выберите концентрацию поворотной точки с комплексным значением жизненной силы клетки в качестве максимальной концентрации безопасности. Согласно результатам теста МТТ можно видеть, что по сравнению с контролем растворителя, когда концентрация образца раствора этанола прополиса составляет 0,08%, клетки относительно клеток относительно значения жизненной силы составляет 128,27%, без цитотоксично Образец раствора составляет 0,08%, относительная ценность жизненной силы клетки составляет 126,16%, а цитотоксичность.

2.2. 2 Результаты морфологического обнаружения основаны на результатах теста МТТ. Выберите 5 Концентрации для морфологического обнаружения. См. Рисунок 3 и Рисунок 3 и Рисунок 4.

В соответствии с результатами морфологических результатов можно видеть, что раствор этанола прополиса и полиэттер прополиса B. Когда концентрация образца Алкогольной растворы составляет 0,08%, контур края клеток является ясным, а морфологические правила. В клетке нет очевидных частиц, и нет очевидной отличия от статуса клеток контрольной группы растворителя. Образец раствора этиленгликоля - это На основании максимальной безопасности фибробластов человека.Через 0,08%.


по сравнению с непривлекательной группой BC, ROS Содержание после излучения UVA значительно увеличилось (P  LT; 0,01), что указывает на то, что модель повреждения окисления успешна; по сравнению с группой излучения UVA, группа PC значительно снизила содержание ROS (P  LT; 0,01), Когда образец раствора этанола прополиса составлял 0,08%от концентрации введения, содержание АФК было значительно снижено (P  LT; 0,01), а скорость ингибирования АФК составляла 13,39%. Когда образец раствора полиэтиленгликоля полиэтиленгликоля составляет 0,08%от концентрации введения, содержание АФК значительно снижается (P  LT; 0,05), а его ингибирующая скорость составляет 11%, что указывает на то, что образец имеет эффект удаления ROS и достигает антиоксиданта. .


по сравнению с группой Blank Control BC, группа NC отрицательного контроля прошла излучение UVA, экспрессия MMP-1 и содержание MMP-1 значительно увеличилось (P  LT; 0,01 ), и это указывает на то, что модель UVA является успешной; по сравнению с отрицательным контролем NC (UVA Radiation), экспрессия MMP-1 двух групп образцов значительно снижается (P  LT; 0,05), которая оказывает эффект подавления на уровне гена MMP-1; 2 Содержание MMP-1 в группе образцов чрезвычайно значительное (P  LT; 0,01), из которого содержание MMP-1 в группе лечения раствора этанола прополиса ниже группы BC, которая является не облучен. 0,08%может ингибировать синтез ММР-1 при концентрации 0,08%, поэтому два образца могут ингибировать деградацию ECM путем ингибирования экспрессии MMP-1, тем самым достигая определенного эффекта антисветного старения. .


3 Обсуждение

по сравнению с группой отрицательного контроля NC (UVA+), раствор этанола прополиса и раствор полиеттерола прополиса находятся в 0,08 %концентрация введения при 0,08%., Она оказывает очень значительное снижение содержания АФК; и может значительно снизить количество экспрессии гена MMP-1 в гене MMP-1, связанном с фибробластами; он имеет очень значительное снижение. Влияние на содержание MMP-1. С одной стороны, раствор этиленгликоля может предотвратить выработку старения кожи, индуцированные свободными радикалами путем удаления активного кислородного АФК, а другая оказывает значительное ингибирующее влияние на MMP-1 на генетических уровнях и уровни белка. Деградация деградации для достижения влияния антисветного старения. По сравнению с 75%полиэтиленгликолем в качестве растворителя 75%этанол используется в качестве растворителя для растворения прополисаСкорость подавления OS выше, окисленные гены MMP-1 имеют меньшую экспрессию, а содержание MMP-1 ниже; можно предположить, что растворы этанола прополиса обладают более высокой анти-светской активностью старения, чем растворы полиэтиленгликоля полиэтиленаполиса.
.

В настоящее время предотвращение и задержка старения кожи стала одной из исследовательских горячих точек в области медицины, косметики и биоматериалов. Старение кожи можно разделить на эндогенное старение, вызванное внутренним факторами и внешними факторами, вызванными внешними факторами. , из которых ультрафиолетовое излучение является наиболее важным фактором [21. Безопасная и эффективная профилактика и лечение разработки продуктов старения света является важным направлением для связанных отраслей. Это исследование, как ожидается, способствует дальнейшему развитию индустрии продуктов BEE. Но текущий Исследования по -прежнему имеют некоторые недостатки. Во -первых, существует меньше исследований по борьбе с прозрачным старением, таких как ингредиенты активности прополиса, фенольная кислота и пирин. Связанные гены и стареющие индикаторы, такие как клеточный цикл, митохондриальный слитый белок, стимуляция окисления. Связанная экспрессия генов и т. Д., До сих пор не хватает механизмов защиты прополиса на организм, что играет скоординированную роль на всем теле, а не простая пара паров. Ингибирующее или продвижение эффекта определенного материала или сигнального пути пути . Можно ли применять прополис к профилактике и лечению антисветного старения по -прежнему нуждается в большом количестве исследований.

What Can I Do For You?

You can Send Message or email info@qinsun-lab.com to us, we will reply tu you within 24 hours.Now tell us your need,there will be more favorable prices!

toTop